MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。
细胞壁缺陷型细菌培养基(L-型细菌培养基)是一种为支持细胞壁缺失或缺陷型细菌(如L-型细菌)生长而设计的高渗、低毒、富营养的培养基。这类细菌因缺乏完整的细胞壁,不能耐受常规培养基的渗透压,因此必须在培养基中加入高浓度的渗透稳定剂,如蔗糖(10–15%)、NaCl(2–5%)或甘露醇,以维持细胞膜的稳定性,防止细胞破裂。L-型细菌通常由某些抗生物质(如青霉素、头孢类)诱导产生,也可在某些慢性沾染或免疫抑制状态下自然出现。由于其生长缓慢、形态多变、常规培养难以检出,因此需要的培养基进行分离与培养。细胞壁缺陷型细菌培养基通常以脑心浸液(BHI)或蛋白胨酵母膏为基础,提供丰富的氨基酸、维生素和其他生长因子,促进L-型细菌的复苏与增殖。部分配方还会加入马血清或人血清(5–10%),以提供胆固醇和脂质,进一步增强膜的稳定性。该培养基可用于临床标本(如尿液、血液、关节液)中L-型细菌的分离,尤其适用于慢性、反复沾染但常规培养阴性的病例。接种后通常在35–37℃、5% CO₂条件下培养3–7天,L-型细菌可形成“油煎蛋”样菌落,即致密、边缘扩散的微小菌落,需用倒置显微镜观察确认。食萘海神单胞菌用长赖氨酸芽孢杆菌菌液灌根,番茄根结线虫侵染率下降42%,果实Vc含量提高12%,产量增8.3%。

甲基营养型芽孢杆菌是土壤里的“碳链炼金师”。它以甲醇、甲胺等一碳化合物为主食,却能把这些常被忽视的小分子变成高值产物。菌体在含甲醇的培养基中迅速萌发,分泌甲醇脱氢酶,将有毒的甲醇先氧化为甲醛,再经RuMP循环固定为果糖-6-磷酸,既获得能量,又合成自身所需碳骨架。整套反应在pH 7、30℃下效率比较高,甲醇转化率可达理论值的92%,远高于化学催化。更难得的是,它同时是一株“生物兵工厂”。在利用甲醇的同时,甲基营养型芽孢杆菌能合成表面活性素、泛革素等脂肽,对黄瓜枯萎、辣椒疫霉、番茄青枯的抑菌带宽达25-30毫米;其挥发性的3-甲基-1-丁醇、2-甲基吡嗪可诱导植物系统抗性,使棉花黄萎病指下降40%。田间试验表明,每亩用200克菌粉滴灌,玉米根际甲醇天然浓度降低60%,植株叶绿素提高1.5个SPAD单位,产量增加8%,且农药使用量减少三成。工业端,科研团队把聚-γ-谷氨酸合成酶基因导入甲基营养型芽孢杆菌,使其在消耗甲醇的同时产出高黏度γ-PGA,可作为保水剂、絮凝剂或医用敷料;5吨罐分批发酵,γ-PGA产量达25 g/L,成本比传统谷氨酸发酵低20%。此外,其芽孢可耐沸水煮15分钟、紫外照射两小时,喷雾干燥存活率超过90%,为大规模制剂化提供了便利。
施氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)是芽孢杆菌属中少见的“高温工匠”,标准菌株 JCM 9076 更早从堆肥深处分离,可在 30–65 ℃、pH 4.5–9.0 范围内旺盛生长,更适温度 55 ℃,芽孢耐 100 ℃沸水 2 h 仍存活,是验证高压蒸汽灭菌的指示菌之一。其耐热关键在于芽孢内高浓度吡啶二羧酸钙(DPA-Ca)结合低水分状态,配合小分子热休克蛋白,使酶与 DNA 在高温下依旧稳定。2024 年,中国团队从湖南镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2(保藏号 CCTCC M2024167),鉴定为 B. smithii。该菌可在 50 mg L⁻¹ Cd²⁺、6 % NaCl 条件下正常分泌有机酸,将难溶磷酸钙转化为磷,盆栽玉米根际有效磷提高 42 %,籽粒镉含量下降 35 %,实现“增磷减镉”同步完成。在工业酶方向,施氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其耐碱性 α-淀粉酶更适温度 70 ℃,在淀粉液化、纺织退浆中可省去降温环节,节能 15 %;耐热蛋白酶在 60 ℃、30 % 乙醇中仍保持 80 % 活性,为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上,M2 菌株与秸秆堆肥复配,可使堆体 24 h 升至 65 ℃,纤维素降解率提高 30 %,堆肥周期缩短 7 d;作为功能性菌剂,每亩基施 200 g 菌粉,冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘖数增加 1.2 个,对后期倒伏有明显缓解作用。鲑色野野村氏菌革兰氏阳性,基丝和气丝极多分枝。气丝上产生钩状、螺旋形或直孢子链,孢子表面光滑或有疣。

耐盐魏斯氏菌(Weissella spp.)是一类革兰氏阳性、兼性厌氧的乳酸菌,广存在于酱油、泡菜、奶酪等高盐发酵食品中。该菌属成员如融合魏斯氏菌(W. confusa)、食窦魏斯氏菌(W. cibaria)和类肠膜魏斯氏菌(W. paramesenteroides)均表现出优异的耐盐性能,能在18% NaCl的高盐环境中保持活性,其中W. paramesenteroides的耐盐性和低温生长能力尤为突出,成为酱醪发酵中的优势菌种。耐盐魏斯氏菌不仅能适应高渗透压环境,还能通过合成胞外多糖(EPS)、有机酸和细菌素等代谢产物,赋予发酵食品独特的风味和质地。例如,W. confusa的EPS产量可达3.34 g/L,明显改善产品的乳化性和口感;W. cibaria在泡菜发酵前期可迅速提升乳酸和乙酸含量,增强产品醇香风味。此外,部分菌株还具备抑菌、抗氧化和降胆固醇等益生特性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等病原菌有抑制作用,并能降解甘油三酯和胆固醇,展现出开发为功能性益生菌的潜力。综上所述,耐盐魏斯氏菌凭借其高盐适应性、代谢多样性和益生功能,在传统发酵食品和现代功能性食品开发中均具有广阔的应用前景。浸麻类芽孢杆菌(Bacillus rettgeri)作为一种特殊的微生物,为这一课题提供了极具潜力的解决方案。短稳杆菌
作为植物病原菌,野油菜黄单胞菌对多种常用抗生物质具有耐药性,这给医学方面带来了挑战。鸡肠球菌
假坚强芽孢杆菌(Bacillus pseudofirmus)是芽孢杆菌属中“外柔内刚”的。菌落洁白、边缘整齐,杆状细胞可形成椭圆芽孢,且具周身鞭毛,能运动;它耐碱、耐盐、耐干燥,可在pH 9–11、8 % NaCl的极端环境中旺盛生长,故得名“假坚强”。首要本领是“生物降碱”。菌株OF4从肯尼亚盐碱湖分离,基因组携带多拷贝Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因,可在高盐高碱条件下维持胞内pH 7.5,同时分泌苹果酸、乳酸等有机酸,2 d内将周围pH由10降至8,为后定植作物营造“微酸绿洲”。盆栽试验中,用10⁷ CFU/g菌液拌土,碱蓬根际交换性钠下降35 %,燕麦出苗率提高50 %,产量增加18 %。第二板斧是“防病促生”。菌株BRCB16可产生环脂肽与几丁质酶,抑制番茄立枯、棉花黄萎等病原菌,抑菌带宽达25 mm;同时分泌IAA 15 mg/L,诱导玉米侧根增加30 %,吸磷量提升20 %。新疆盐碱棉田每亩滴灌200 g菌粉,黄萎病指降低42 %,皮棉增产8.6 %。工业端,假坚强芽孢杆菌是“碱性酶工厂”。其耐碱木聚糖酶更适pH 10,90 ℃半衰期2 h,用于纸浆漂白可减少氯用量30 %;耐碱蛋白酶已列入洗涤剂助剂,低温下仍能有效分解血渍、奶渍,节能20 %。鸡肠球菌