志贺氏菌显色培养基

以MS培养基母液为基础，向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，铁盐100×母液20mL，维生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培养基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水，加入40g蔗糖后搅拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂，将铝锅置于电炉上，搅拌加热使琼脂完全溶化，然后用蒸馏水定容至终体积2L，继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。3%NaCl精氨酸双水解酶试验培养基 3%NaCl氨基酸脱羧酶试验对照培养基 MRVP培养基 动力培养基 淀粉水解培养基。志贺氏菌显色培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。特制霉菌及酵母菌培养基葡萄糖琼脂 动力-吲哚-尿素(MIU)培养基基础 V-P半固体琼脂(VP) 西蒙氏柠檬酸盐琼脂枸橼酸盐琼脂。

细菌培养基之牛肉膏琼脂培养基：牛肉膏0.3g ，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5g，水100ml在烧杯内加水100ml，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2-7.6，分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15-30分钟。牛心培养基：取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。LG培养基 SSM琼脂 平板计数琼脂(PCA)标准方法琼脂(SA) TAT肉汤基础 心浸液肉汤（Huntoon）HIB培养基。

T2811Iso-Sensitest肉汤10L/瓶540培养基配方（每升）水解酪蛋白11.0g；葡萄糖2.0g；蛋白胨3.0g；氯化钠3.0g；可溶性淀粉1.0g；磷酸氢二钠2.0g；醋酸钠1.0g；甘油磷酸镁0.2g；葡萄糖酸钙0.1g；硫酸钴0.001g；硫酸铜0.001g；硫酸锌0.001g；硫酸亚铁0.001g；氯化锰0.002g；维生素K0.001g；VB120.001g；L-色氨酸0.02g；VB60.003g；泛酸钙0.003g；尼克酰胺0.003g；生物素0.3mg；VB10.04mg；腺嘌呤0.01g；鸟嘌呤0.01g；黄嘌呤0.01g；尿嘧啶0.01g；L-半胱氨酸盐酸盐0.02g；pH7.4±0.2（25℃）使用说明称取本品23.4g于1L蒸馏水或去离子水中，煮沸溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。本品为可能有少量不溶物。T2812***培养基A（PH7.9）250g/瓶220培养基配方（每升）Peptone（蛋白胨）6.0gPancreaticDigestofCasein（酪蛋白胰酶消化物）4.0gBeefExtract（牛肉浸粉）1.5gYeastExtract（酵母浸粉）3.0gDextrosemonohydrate（葡萄糖）1.0gAgar（琼脂）15.0gpH7.9±0.1（25℃）使用说明称取本品30.5g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固，备用。AB培养基基础 地杆菌培养基基础 硫还原泥土杆菌培养基基础 固氮菌琼脂(甘露醇) 固氮菌肉汤（甘露醇，葡萄糖）。麸皮液体培养基

0.9%氯化钠 大肠杆菌噬菌体ΦX174液体培养基 乳糖发酵培养基/乳糖复发酵培养基 伊红美蓝琼脂(不含乳糖)。志贺氏菌显色培养基

T3052蛋白胨淀粉酵母培养基250g/瓶450配方：（/L）蛋白胨23.0g淀粉1.0g酵母提取物6.0g琼脂粉10.0gNaCl2.0gKNO31.0gK2HPO4•3H2O0.5gMgSO4•7H2O0.5gFeSO4•7H2O0.01gpH7.1-7.5（25℃）使用方法：取本品粉末44.01g溶解于950ml的蒸馏水或去离子水，加热沸腾后分装，121度灭菌15分钟后，待温度降至55度时加入50ml脱纤维羊血，倾注至培养皿凝固后冷藏待用。T3053铁细菌肉汤250g/瓶115用途：用于水中铁细菌培养成分（/L）：柠檬酸铁铵10.0g硫酸镁0.5g硫酸亚铁铵0.5g磷酸氢二钾0.5g氯化钙0.2g硝酸钠0.5gpH值6.9±0.1(25℃)用法：称取本品12.2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。T3054铁细菌培养基250g/瓶115用途：用于铁细菌的分离培养。成分（/L）柠檬酸铁铵10.0g硫酸镁0.5g硫酸亚铁铵0.5g磷酸氢二钾0.5g氯化钙0.2g硝酸钠0.5g琼脂15.0gpH值6.8-7.0(25℃)用法:称取本品27.2克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟备用。志贺氏菌显色培养基

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