若宿主细胞残留 DNA 检测扩增效率未达标，建议分阶排查。第一步查数据：调取标曲扩增图，核对是否呈标准 S 型、整体荧光值是否过低、复孔信号是否重叠、通道选择是否恰当、是否存在离群孔及程序参数是否准确。第二步查耗材设备：验证 EP 管是否无菌低吸附，移液器与 PCR 仪是否在校验期内，仪器与耗材规格是否匹配。第三步查人员试剂：对比是否只有个别操作者结果异常，确认试剂储存温度及冻融次数是否合规，并定位异常是否自某时点集中爆发。完成三轮筛查后，细审操作：梯度稀释是否充分涡旋且时长足够，吸液前是否预润吸头，移液速度是否一致，MIX 是否适度颠倒或短时涡旋，上机前是否再次离心混匀，分析时基线区间与阈值设定是否得当，ROX 修正步骤是否执行到位。实时定量PCR（qPCR）凭借高灵敏度和特异性，成为宿主细胞残留DNA检测的主流方法。四川生物制品宿主细胞残留DNA检测方案
围绕宿主细胞残留DNA检测，湖州申科生物搭建了完整的开发流程。第一步借助生物信息学分析进行引物探针设计，筛选适宜的靶标序列并构建高效引物探针。第二步确认PCR-荧光探针法检测体系，标准曲线需设置至少5个浓度点，扩增效率控制在83.3%-110%、R²≥0.980，同时保障方法的专属性与合理定量限。第三步推进方法验证，确保符合《中国药典》四部9101、ICHQ2(R2)等指导原则及相关申报规范。第四步实施样品检测，参照《中国药典》三部3407、USP<509>标准，设置充足的中间质控样品，通过多环节管控保障检测的科学性、规范性与可靠性，为宿主细胞残留DNA检测提供有效技术支撑。
四川qPCR法宿主细胞残留DNA检测常见问题宿主细胞残留DNA检测体系的稳定性依赖于参考品标定和试剂批间差异控制。
SHENTEK® CHO 残留 DNA 检测试剂盒，可对各类生物制品及药品的中间品、半成品与成品中残留的 CHO 宿主细胞 DNA 进行定量检测。该试剂盒基于荧光探针原理实现对样品中 CHO 残留 DNA 的定量，不仅检测高效快速、专一性突出、性能稳定可靠，检测限还能达到 fg 级别。试剂盒配套提供 CHO DNA 定量参考品，且该参考品已通过严格溯源至国家标准品，能有效保障检测结果的准确性与可追溯性。该试剂盒与 SHENTEK® 宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒搭配使用，能够准确定量样品中残留的微量 CHO 细胞 DNA。
SHENTEK® MDCK 残留 DNA 检测试剂盒，可对各类生物制品中间品、半成品及成品中的 MDCK 宿主细胞 DNA 开展定量检测。该试剂盒凭借荧光探针原理实现对样品中 MDCK 残留 DNA 的定量检测，不仅检测速度快、专一性突出、性能稳定可靠，检测限还可达到 fg 级别，且试剂盒内还配套提供 MDCK DNA 定量参考品。该试剂盒与 SHENTEK® 宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒搭配使用，整个分析系统通过优化前处理与检测步骤的适配效果，提升 MDCK 细胞微量 DNA 残留的回收率及定量准确度。
湖州申科生物系列宿主细胞残留DNA检测试剂盒配套参考品，已溯源至国家标准品。
湖州申科生物疫苗制剂宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒，采用磁珠法进行核酸提取纯化。结合疫苗制剂的产品特性，该试剂盒优化了试剂配方，适用于疫苗成品（如Vero细胞生产的狂犬病疫苗）中Vero残留DNA的样品前处理，能稳定高效获取样品中的痕量DNA，可与各款SHENTEK®宿主细胞DNAqPCR检测试剂盒搭配使用。此外，该试剂盒可借助rHCDpurify®前处理系统实现样品自动处理。若样品含铝佐剂或右旋糖苷，具体处理方式可咨询湖州申科生物技术股份有限公司。
单克隆抗体与重组蛋白药物领域，需检测 CHO 细胞等残留 DNA，把控药物安全与有效性。昆虫细胞（杆状病毒）宿主细胞残留DNA检测
宿主细胞残留DNA检测磁珠法自动化提取实现高通量样品处理，提升效率。四川生物制品宿主细胞残留DNA检测方案
启动宿主细胞残留 DNA（HCD）检测方法验证前，需围绕文件要求与样品处理两大维度做好准备。文件要求上，应通过研究方案、研究计划、报告或标准操作程序（SOP），提前明确规范生物分析方法的具体内容，为后续验证奠定合规基础。样品处理方面，若检测中样品出现抑制现象，可考虑采用稀释方式解决，但稀释后的检测值需处于可信区间内；对于复杂样品，若稀释无法消除抑制影响，则需通过样品前处理手段提取 DNA 后再开展检测，以此保障检测结果的准确可靠，确保 HCD 方法验证高效、顺利推进。
四川生物制品宿主细胞残留DNA检测方案
