细胞基因治疗产品用宿主细胞蛋白（HCP）残留检测试剂盒

湖州申科运用免疫磁珠分离技术（IMBS），搭配 2D 电泳或 LC-MS 技术评估抗体覆盖率。IMBS 的主要流程涵盖：多克隆抗体与磁珠的偶联反应、磁珠未结合位点的封闭处理、HCP 样本与结合抗体的磁珠共同孵育反应。该过程中，HCP 抗体会结合可识别的 HCP，未被识别的 HCP 则通过后续洗涤步骤去除，随后借助低 pH 等洗脱条件，收集抗体捕获的 HCP。此方法具备 AAE（抗体亲和提取，Antibody Affinity Extraction）免疫层析柱分离的全部优势，同时免疫磁珠可在悬浮状态下与 HCP 样品充分混匀并结合，HCP 结合效果更优；且依托磁珠吸附，能减少 HCP 与填料的非特异性吸附，进一步提升实验准确性。

在关键物料开发基础上，湖州申科生物 HCP ELISA 检测试剂盒的开发流程还包含第三大关键阶段 —— 检测体系开发及验证，这一环节直接关系检测方法的可靠性。公司会开展严格的检测体系开发与验证工作，验证方案完全契合 ICH 指导原则及药典中关于分析方法验证的标准要求，确保检测体系的科学性与合规性。同时，为进一步保障产品品质，公司在生产全流程中严格落实物料质量控制，并全程在洁净车间环境中完成生产，从过程管控层面确保试剂盒方法的稳健性、重现性与法规符合性。这套从抗原源头把控，到关键抗体制备，再到检测体系验证与洁净生产的标准化、合规化全流程开发模式，并非单一环节的质量管控，而是形成了完整的品质保障链条，成为湖州申科 宿主细胞蛋白（HCP）残留检测产品品质与可靠性的重点支撑。

在宿主细胞蛋白（HCP）残留检测的分析方法里，ELISA法应用较多，也是QC日常放行检测的主要方式。该方法操作相对简便、检测精度较好，便于设定控制范围与制定技术规范，适用于产品开发及过程控制；不过，ELISA检测依赖抗原与抗体的特异性结合，因此以生物制品中HCP为免疫原制备的抗体质量，对检测结果影响极大。无论是市售ELISA试剂盒，还是实验室自制的多克隆抗体，若抗体的特异性与适用性不足，都可能导致HCP漏检，进而给生物制品质量安全埋下隐患。另外，ELISA检测HCP时采用多克隆抗体，无法针对性反映高风险HCP残留蛋白的实际存在状况。

湖州申科生物参照 USP 通则 <1132.1> 的相关内容，凭借公司在生物制品质量控制领域十余年的深耕经验，对 LC-MS 检测 HCPs 的方法开展评价与优化。同时通过为 LC-MS 检测 HCPs 的整体流程构建完整质控体系，建立起一套抗干扰能力强、稳定性佳、准确度高且结果真实可靠的 LC-MS 检测 HCPs 标准方法。该检测技术平台包含样品制备、质谱检测、数据生信分析及质谱结果方法验证四个部分，目前利用该 LC-MS 平台已完成对 293T、不同工艺大肠杆菌（E.coli）、CHO、Vero、MDCK、Sf9 等不同工程细胞 HCPs 抗体覆盖率的检测分析。

由于宿主细胞蛋白（HCP）残留检测试剂盒关键组分（校准品、检测抗体）存在固有且明显的变异度，不同试剂盒对同一样本的检测结果，不仅可能在数值上出现较大差距，在特定 HCP（如低丰度或高风险 HCP）的检出能力上，也可能存在明显偏差，这对生物制品 HCP 残留的准确管控构成挑战。因此，为确保检测结果能真实反映自身产品的 HCP 残留状况，企业必须结合自身产品特性（如宿主细胞类型、目标产物属性）与生产工艺特点，对不同品牌、不同类型的试剂盒开展系统且详细的平行比对实验。同时，还需进行针对性的适用性评估，验证试剂盒对自身产品的检测准确性、特异性及稳定性，再筛选出与自身产品匹配度适合的检测方案，为生物制品的 HCP 残留控制提供可靠技术支撑，保障产品质量与用药安全。

美国药典 USP 通则 <1132.1>《质谱法测定生物药中残留宿主细胞蛋白》（Residual Host Cell Protein Measurement in Biopharmaceuticals by Mass Spectrometry），主要内容是介绍 LC-MS 技术在宿主细胞残留蛋白检测中的应用。该通则围绕样品制备、质谱测试条件建立、数据分析、质谱方法验证等维度，详细说明质谱技术应用于 HCPs 检测的优势及需注意的事项。作为先进的分析技术平台，质谱技术在 HCPs 分析中的应用，无论是单独使用，还是与 ELISA 及其他分析方法联合使用，都能帮助生产企业在产品全生命周期中更清晰地理解并建立 HCPs 检测方法，进而保障产品质量稳定。