湖南免疫细胞产品支原体检测可比性验证

AdvSHENTEK外源因子全自动核酸检测分析系统凭借优越性能，为支原体检测提供坚实技术支撑。硬件方面，系统温度运行精度≤0.5℃，温度波动控制在 ±0.5℃以内，荧光强度 CV≤3%，确保检测结果的重复性与准确性；4 通道单独运行且支持同步检测，通道可叠加延展，兼顾检测效率与灵活性。软件方面，系统具备三级权限管理、日志审计追踪功能，完全符合 21CFR Part11 法规要求，支持 LIMS 系统连接、USB 数据导出及打印机直接打印，满足企业合规追溯需求。此外，系统运输与储存便捷，仪器可常规运输，检测试剂盒在 2-8℃环境下即可稳定保存，无需特殊冷链条件，进一步提升了产品的实用性与适配性。

2023 年美国国立卫生研究院（NIH）的对比研究得出一个结论是并非所有商业化支原体检测试剂盒都能满足替代传统方法的要求，研究对市面上 5 款主流试剂盒（ATCC、梅里埃、赛默飞、罗氏、MB）进行测试，发现不同试剂盒对不同支原体菌株的检测灵敏度差异明显，部分产品无法达到宣称的≤10 CFU/mL 检测限（符合欧、日药典替代培养法的要求）。例如，ATCC 试剂盒对莱氏无胆甾原体、精氨酸支原体的检测限只为 100 CFU/mL，MB 试剂盒对硬蜱螺原体无法检出（>1000 CFU/mL）。这一现象表明，试剂盒的检测性能与支原体菌株特性密切相关，因此企业需根据待测样品的原辅料来源和检测目的，对试剂盒进行严格的性能验证，避免因检测限不达标导致质量风险。

支原体 NAT 检测的准确性与可靠性受多重因素综合影响，需从人员、方法、设备、试剂耗材、实验室环境五方面严格把控。人员需接受专业培训，熟练掌握 PCR 技术理论与实操流程，积累足够经验并具备责任心，确保操作规范性。方法建立需遵循合理流程并完成充分验证，避免因方法缺陷导致结果偏差。设备方面，PCR 仪与前处理设备的性能、精度、稳定性及定期校准至关重要，直接影响检测数据的重复性。试剂耗材需满足要求：前处理试剂能应对复杂样本基质、耐受常见干扰，检测试剂经性能验证且批间稳定性良好，同时需选用质量合格的耗材。实验室需合理布局，建立完善的管理规范与污染防控措施，为检测提供洁净、可控的环境，避免外部因素干扰。

湖州申科围绕 USP 支原体培养法，提供技术服务，满足生物制剂企业的合规需求。服务内容包括两项：一是支原体培养法样品检测服务，严格遵循 USP 63 标准流程执行，确保检测结果合规有效；二是支原体培养法样品适用性验证服务，针对供试品特性开展定制化验证，保障检测方法与样品的适配性。所有检测与验证完成后，公司将出具标准化报告，报告可直接用于项目申报、审批、工艺优化等场景，为企业产品质量控制提供依据。通过专业的技术服务，帮助企业规避合规风险，确保生物制剂生产全流程的质量与安全性，助力企业高效推进产品研发与上市进程。

湖州申科推出的 MycoSHENTEK^® 支原体验证菌株，符合全球药典要求，目前已提供口腔支原体、肺炎支原体、猪鼻支原体三种菌株，后续将逐步扩充其他验证用菌株。该系列菌株溯源至全球保藏机构并获得正式授权，经培养法测定 CFU（菌落形成单位）与 dPCR 法测定 GC（基因组拷贝数），实现准确定量标定，浓度涵盖 10CFU 和 100CFU 两种规格，每盒含 3 管，完全满足支原体检测方法验证需求。菌株经灭活处理，无风险，使用时只需加入相应体积样品基质即可开展验证，操作便捷，同时通过双重定量检测确保质量可控，为 NAT 方法验证提供可靠的标准物质支撑。

支原体 NAT 检测的特异性验证面临主要挑战：需设计覆盖多种支原体的 PCR 引物，而覆盖范围越广，越可能因支原体与革兰氏阳性菌的系统进化相关性，出现交叉检测现象，影响结果准确性。因此，特异性验证需重点排查非目标微生物的干扰，确保检测结果的专一性。稳健性验证同样关键，需证实检测方法在人为引入的微小参数变化（如反应温度、试剂浓度波动等）下，仍能保持结果稳定，避免因实验条件差异导致的检测偏差。这两项验证直接决定了 NAT 方法在不同实验室、不同操作场景下的适用性，是其获得法规认可的重要前提。