MB培养基基础(Marine Broth Base)是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基,由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成,pH 7.2–7.6,渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%,并补充镁、钾、钙等海水中主要离子,可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌,缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后,补加陈海水或人工海盐,即可恢复接近自然海水的离子谱,使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长,用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖,MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能:弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时,菌浓即可达10⁹ CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus则分泌墨蓝色素,使整瓶培养液变为靛蓝,成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养,只需补加1.5%琼脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉积物悬液,28℃培养2–3天,挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定,流程简洁高效。在质量控制方面,MB培养基需用人工海水或陈海水配制,切忌直接使用自来水,以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体;灭菌后若出现沉淀,多为镁盐析出,可50℃水浴复溶,不影响使用。
枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus subtilis subsp. spizizenii)是“枯草家族”里的轻骑兵,菌体纤细,却藏着一套“攻防兼备”的微生物 toolkit。1930 年代被 Spizizen 从沙漠尘土中分离,因而得名。它更擅在 35–45 ℃、低湿度的热旱边际快速萌发,芽孢外壁含特殊吡啶二羧酸钙层,可耐 90 ℃热水 20 min、紫外 5000 μW·s/cm² 仍存活,为制剂长途运输省下冷链成本。复苏后,斯氏亚种先分泌高活性 surfactin、fengycin 与 bacillomycin D,三脂肽协同击穿病原菌膜,对番茄青枯、辣椒疫霉、小麦纹枯的抑菌带宽达 28–32 mm;同时释放挥发性 2,3-丁二醇,启动植物 ISR 信号,使叶片过氧化物酶活性提高 1.8 倍,达到“未病先防”。田间试验中,每亩用 100 g 斯氏亚种可湿粉拌种,玉米出苗率提升 12%,后期纹枯病指降 46%,产量增 8.3%;若与滴灌同施,可使连作草莓根际尖孢镰刀菌数量下降 70%,果实可溶性糖提高 1.2 度,货架期延长 3 天。更妙的是,它能合成耐碱 α-淀粉酶与β-葡聚糖酶,在 pH 9.5、温度 50 ℃ 条件下仍保持 80% 酶活,用于青贮饲料可提前 2 天完成乳酸发酵,降低干物质损耗 3%。目前,工厂采用糖蜜—豆粕深部好氧发酵,48 h 芽孢量可达 5×10¹⁰ CFU/mL,喷雾干燥后存活率 > 95%,制成黑衣粉剂,保质期 24 个月。环发仙菌牙龈蛋白酶(Gingipains)是牙龈卟啉单胞菌在细胞内合成并分泌到细胞外的一种胰蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶。

扩散芽孢杆菌(Bacillus diffusus)是芽孢杆菌属里的“运动健将”。菌体杆状、周生鞭毛,在琼脂表面可形成迅速扩展的薄膜状菌落,24 h内直径达80 mm,故得名“diffusus”。其更适生长温度30–37 ℃,pH 6–9,耐干燥、耐紫外,芽孢可存活十年以上,为制剂化提供质量特性。一、快速定殖菌株DSM 13271分泌大量胞外多糖,降低表面张力,使菌体在沙壤土中迁移速度提高3倍;与枯草芽孢杆菌复配,可形成“生物被膜”,优先占据根际生态位,抑制病原菌入侵。二、广谱抑菌扩散芽孢杆菌产生diffusin脂肽,对番茄青枯、辣椒疫霉、棉花黄萎等病原菌抑菌带宽达28 mm;温室试验显示,亩用200 g菌粉滴灌,黄瓜枯萎病指下降45 %,农药用量减少三分之一。三、促生提质菌株IAA产量25 mg·L⁻¹,溶磷2.9 mg·L⁻¹,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导玉米侧根增30 %,吸磷量提20 %;新疆盐碱地示范,冬小麦千粒重增1.5 g,产量提高8 %。四、工业酶潜力其耐碱蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比较高,已用于洗涤剂,低温去污力提升25 %;胞外多糖乳化力强,可作为钻井泥浆降滤失剂,耐盐达12 %。
冷解糖芽孢杆菌(Bacillus psychrosaccharolyticus)是芽孢杆菌属的“低温工匠”。菌体在10–40℃皆能生长,更适25–30℃;芽孢椭圆、中生,可耐干燥、耐紫外,货架期长,为制剂化提供质量材料。其名字里的“解糖”源于强大的胞外酶系:淀粉酶、纤维素酶、琼脂糖酶活性高,能把大分子碳源切成低聚糖,既供自己能量,也为周围菌群“开粮仓”,成为低温堆肥、海藻残渣降解的先锋。更难得的是它“抑菌+保水”双技能。平板对峙试验显示,对黄瓜尖孢镰刀菌、棉花立枯丝核菌、茄青枯拉尔氏菌等7种病原菌抑制率超50%,其中对黄瓜枯萎病原抑菌带宽达8mm,抑制率80%以上。机理在于分泌环脂肽和胞外多糖:多糖成膜后降低叶片水分散失,同时吸附Pb²⁺、Cd²⁺、Cu²⁺,1h内对铅吸附量可达50mg/g,为重金属污染农田提供“微胶囊修复”。农业应用上,研究者将冷解糖芽孢杆菌HD-3与枯草、巨大、胶冻样芽孢杆菌复配,再添海藻提取物、氨基酸和微量元素,制成有效活菌数2–10亿/g、有机质20–40%的“复合微生物海藻肥料”。大田试验中,白菜、番茄、棉花增产幅度均超30%,线虫侵染率下降70%,农药用量减少三成;在滴灌肥中添加1‰胞外多糖,玉米抗旱期延长7天,产量提高18%。浸麻类芽孢杆菌(Bacillus rettgeri)作为一种特殊的微生物,为这一课题提供了极具潜力的解决方案。

花园芽孢杆菌(Bacillus horti)更早从花园腐殖土中分离,因而得名。菌落奶白、边缘整齐,杆状细胞具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐碱、耐盐、耐干燥,在pH 6–9、15–45℃范围内生长良好,是典型“环境通吃型”根际益生菌。一、防病降毒花园芽孢杆菌能分泌表面活性素、fengycin等环脂肽,破坏病原膜结构,对立枯丝核菌、番茄青枯拉尔氏菌抑菌带宽达26mm;同时产生芳基酰胺酶,降莠定、甲磺隆等碱性除草剂,土壤残留量7d内下降60%,为连作障碍田“”。二、促生提质菌株IAA产量25mg/L,溶磷3.2mg/L,并产挥发性2,3-丁二醇,诱导黄瓜、生菜根系增30%,叶绿素提高2SPAD单位;大棚试验显示,亩施200g菌粉可使番茄Vc增加12%,糖酸比更协调,货架期延长4d。三、工业酶潜力其耐碱纤维素酶更适pH9、50℃,在洗衣液中仍保持80%活性,可替代化学去渍剂;低温淀粉酶10℃下活力保留70%,为寒区洗碗粉节约能耗20%。四、未来展望借助合成生物学,将花园芽孢杆菌的降毒、促生、耐冷模块植入枯草底盘,可构建“一菌多效”工程菌,用于碱要害田、寒地蔬菜基地及城市绿化基质,让花园芽孢杆菌从“花园”走向更广阔的大地。霍氏肠杆菌触酶试验阴性,分解甘露醇,不分解阿拉伯糖,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5% NaCl的肉汤中生长。北极枝芽孢杆菌
粪肠球菌在有氧呼吸代谢时能够产酸和消耗肠道中的氧气,形成酸性的厌氧条件,从而在抑制致病菌的生长。黄色长孢链霉菌
MY培养基(Malt-Yeast Extract Medium)是“麦芽-酵母”双营养的经典富集培养基,配方简洁却营养爆棚:麦芽浸粉20 g、酵母粉4 g、葡萄糖10 g,补水至1 L,pH自然5.6±0.2,无需调节即可释放麦芽淀粉酶持续供糖,形成“缓释碳源”效应。其低pH与高还原糖组合,既能抑制多数细菌蔓延,又为酵母、丝状菌及嗜酸微藻提供“即食”氮碳,是实验室摇瓶、工业菌种活化与次级代谢研究的“第一步”。在酿酒酵母中,30℃、200 r/min培养16 h,OD₆₀₀轻松破1.5,细胞活性>95%,直接转接乙醇发酵罐可缩短延滞期6 h;若用于产赤霉素藤仓镰刀菌,只需将葡萄糖降至5 g,并补加0.5 g NH₄NO₃,28℃静置5天,赤霉素GA₃产量可达320 mg L⁻¹,比PDB提高40%。MY培养基的另一优势是“可视化”:含2%琼脂即成MYA平板,菌落形态饱满、色素鲜艳,青霉呈蓝绿,红酵母显玫瑰红,常被用作教学示范板。质量控制亦轻松:高压后若颜色加深,说明美拉德反应过度,可改用115℃灭菌20 min;室温存放1个月仍澄清,即可继续使用。凭借其组分明确、成本低廉、配制快速,MY培养基已从传统酿酒实验室走向合成生物学、次级代谢与益生菌高密度发酵,成为微生物学家手中“养菌如泡茶”的经典底牌。黄色长孢链霉菌