Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在PCR产物的克隆中主要应用在以下几个方面:1.**单链DNA的生成**:-Lambda核酸外切酶可以用于从双链DNA中生成单链DNA。由于该酶沿5'→3'方向逐步切去5'单核苷酸,底物是5'磷酸化的双链DNA,因此可以用来消化PCR产物中的一条链,从而生成单链DNA,这对于某些克隆技术来说是必要的步骤。2.**PCR产物的克隆**:-在克隆过程中,有时需要将PCR产物的5'端磷酸化,以便与载体连接。Lambda核酸外切酶可以消化非磷酸化的DNA,从而在一定程度上帮助准备适合克隆的PCR产物。3.**减少自身环化和非特异性连接**:-在连接反应中,为了减少质粒载体的自身环化,可以使用碱性磷酸酶处理质粒DNA以去除5'磷酸基团。而Lambda核酸外切酶可以消化5'端磷酸化的DNA,因此在某些情况下,它可以辅助减少PCR产物的自身环化,尤其是在PCR产物和质粒载体的连接反应中。4.**提高克隆效率**:-通过消化PCR产物中的一条链,Lambda核酸外切酶可以帮助减少PCR产物的非特异性连接,从而提高克隆的效率和准确性。综上所述,Lambda核酸外切酶在PCR产物的克隆中主要通过生成单链DNA、准备适合克隆的PCR产物、减少自身环化和非特异性连接以及提高克隆效率等方面发挥作用。Multiplex Probe qPCR Mix 是一种浓缩预混液,含有抗体技术修饰的热启动酶Hotstart Taq DNA聚合酶。Recombinant Human Persephin

磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒在科研中的应用非常广,主要包括以下几个方面:1.**PCR产物的纯化**:磁珠法试剂盒可以从PCR反应液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、盐类等杂质,回收率高,产物纯度好,可以直接应用于PCR、连接、测序、NGS建库等下游实验。2.**基因组DNA的提取**:适用于从血液、唾液、口腔拭子和动物组织等样品中分离纯化高质量基因组DNA,提取的DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠,适合高通量工作站的自动化提取。3.**质粒DNA的提取**:磁珠用于从粗制的提取物中分离质粒DNA,通过精心优化的溶液将质粒DNA从基因组DNA和蛋白质中分离出来。4.**DNA片段的分离**:有许多类型的DNA分离试剂盒可供选择,包括DNA片段的分离。DNA片段可能需要为下一代测序协议进行分离,在这种情况下,可以用能选择分子大小的磁珠来分离片段。5.**自动化和高通量操作**:磁珠法试剂盒适合手工操作,也可用于自动化工作站或核酸自动提取仪,实现高通量操作。6.**分子生物学研究**:磁珠法试剂盒在基因组研究、分子进化研究等领域有广泛应用,为遗传病研究、筛查等提供了强有力的技术支持。Kallikrein Inhibitor在50 μL的反应体系中,建议使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。这种酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶结构域,因此它具有链置换活性,可以用于重组酶聚合酶扩增(RPA)等恒温扩增技术。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些关键特性和应用:1.**活性定义**:在37°C条件下,30分钟内将10nmol的dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。2.**热失活条件**:75°C,20分钟。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**储存条件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事项**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配对的突出末端,因而不适用于生成平齐末端。-25°C时BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3'-5'exo-)的两倍。6.**应用**:-随机引物法标记。-cDNA第二条链的合成。-单个dA的加尾。-链置换的DNA合成。
质粒DNA提取后的储存条件对于保持其活性至关重要。以下是一些推荐的储存方法:1.**干燥保存**:质粒DNA以干粉状态保存是比较好的方法。如果总DNA以溶液形式保存,可以使用1×TE缓冲液稀释,且TE缓冲液的pH值应为8.0-8.5之间。2.**低温保存**:植物总DNA低温保存比较好在-80℃以下或液氮保存。如果没有条件,也可以在-20℃保存。总DNA应避免经常冻融,同时建议每份样品保存3-5个样本。总DNA提取后保存的时限通常较组织要长(>两年),但若长期保存,每隔两年应抽测,对不符合使用要求的DNA进行更新。3.**避免反复冻融**:反复冻融会破坏DNA的完整性和活性,因此应尽量避免。4.**使用保护剂**:化学添加剂如二甲基亚砜(DMSO)可以防止DNA单链断裂,但因其毒性和使用量的问题,并不是理想的保护剂。5.**封装技术**:通过封装技术保存DNA,可以隔绝外界水、氧气和光等可能影响DNA稳定的因素。例如,DNAshell®技术基于密封的不锈钢微型胶囊,在惰性气氛下,给予DNA干粉保护。6.**使用稳定剂**:一些天然的双糖,如海藻糖,被认为是一种多功能的保护剂,可以保护生物体免受冷冻、加热等不利条件的影响。UBE2L3作为泛素化途径中的关键酶,其在蛋白质降解、信号传导、细胞周期控制等重要内容有着作用。

BstDNA聚合酶对dUTP的耐受性对实验结果有以下影响:1.**防止交叉污染**:BstDNA聚合酶具有较高的dUTP耐受性,这意味着它可以在反应体系中添加dUTP/UDG酶防污染系统的情况下工作,有效防止LAMP产物的交叉污染,确保数据的准确性。2.**保持灵敏度和扩增效率**:即使在引入dUTP/UDG酶防污染系统,使用dUTP替换dTTP的情况下,BstDNA聚合酶的灵敏度及扩增效率不受影响。实验数据显示,在反应体系中添加dUTP对BstDNA聚合酶的扩增灵敏度和效率没有负面影响。3.**提高实验的可靠性**:由于BstDNA聚合酶能够在高浓度的dUTP存在下保持活性,这使得它在进行等温扩增时更加可靠,尤其是在需要防止DNA污染的实验中。4.**兼容dUTP/UDG系统**:BstDNA聚合酶对dUTP的耐受性好,高度兼容dUTP/UDG系统,这对于避免交叉污染和提高实验结果的准确性至关重要。综上所述,BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性为等温扩增实验提供了一个重要的优势,即在保持高灵敏度和扩增效率的同时,能够有效防止交叉污染,从而提高实验结果的可靠性和准确性。研究表明,优化后的Cas12a系统在多种细胞类型中表现出良好的编辑效率。Recombinant Human VEGFR2/KDR(mFc Tag)
CRISPR/Cas12a 是一种单一的RNA引导的核酸内切酶,通过CRISPR/Cas9系统为靶向基因组工程提供了新的机会。Recombinant Human Persephin
Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease,简称λExonuclease)是一种具有特定特性和应用的酶,以下是其主要特点和应用:1.**特异性作用**:λExonuclease是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**酶切活性**:对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**嗜磷酸性**:该酶具有非常强的嗜磷酸性,磷酸化的核酸链与非磷酸化的核酸链的切割效率相差达200倍以上。4.**切割效率**:Lambda核酸外切酶是一种具有高度持续性的碱性核酸外切酶,可以连续地将核酸切割成为单个碱基,切割比较高速率可以达到1000nt/S。5.**应用领域**:-生成单链PCR产物用于DNA测序。-DNA单链构象多态性(SSCP)分析。-滚环扩增。-从双链DNA片段生成单链DNA。-PCR产物的克隆。-质粒制备净化。6.**酶活性定义**:Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoproduce10nmolofacid-solubledeoxyribonucleotidefromdouble-strandedsubstrateinatotalreactionvolumeof50μlin30minutesat37ºCin1XLambdaExonucleaseReactionBufferwith1μgsonicatedduplex[3H]-DNA。Recombinant Human Persephin
5×RNALoadingBuffer:RNA电泳中的关键试剂5×RNALoadingBuffer是一种为RNA凝胶电泳设计的即用型试剂,广泛应用于RN片段的分离和分析。它通过添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使RNA样品在电泳过程中更容易沉降并被观察,是RNA研究中不可或缺的工具。产品特点高密度与染料标记:5×RNALoadingBuffer含有高浓度的甘油或蔗糖,能够使RNA样品在电泳时沉降于凝胶孔底部,避免漂浮。同时,其中的染料(如溴酚蓝或二甲苯蓝)可以指示RNA迁移的位置,便于实时观察电泳进程。即用型设计:无需额外配制,直接与RNA样品混合即可使用,简化了实验操作。兼容性强:适...