上海免疫细胞产品支原体检测指示细胞培养法

阴性翘尾是支原体 NAT 检测中常见的异常现象，表现为 NCS 或 NTC 出现扩增信号，Ct 值多在 35~40 之间，需科学评估并处理。首先考虑污染因素，可能是阴性对照被阳性样本、试剂或环境气溶胶污染，建议立即复测，复测时使用带滤芯低吸附 TIP 头，严格执行阴阳性分区操作，注重细节防控。其次需排除背景信号等非典型性扩增的干扰，避免误判为污染。若前期验证中频繁出现 NTC 或 NCS 扩增，且已彻底排除污染可能性，可结合已有实验数据重新设置 Cut off 值，确保阈值线能有效区分真实阳性与背景信号，满足实验室检测需求。

MycoSHENTEK^® 支原体 DNA 检测试剂盒参照 EP 2.6.7 和 JP XVII 支原体检测相关要求完成全面性能验证，是经过三方室间验证、性能完全符合药典标准的支原体检测试剂盒。该试剂盒检测灵敏度高达 10CFU/mL，可同时替代传统培养法与指示细胞培养法，大幅缩短检测周期。经实验验证，其对鸡滑液支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾支原体等多种常见污染菌株的检出率均达到 100%（24/24），即使对口腔支原体等低浓度菌株，检出率也满足 95% 以上。凭借覆盖范围广、灵敏度高、性能稳定、合规性强的关键优势，该试剂盒为生物制品企业提供了高效、可靠的支原体检测工具，助力企业满足全球监管要求并保障产品质量。

对照菌株的合理配置是支原体培养法检测准确性的重要保障，湖州申科严格遵循 USP 标准制定菌株使用规范。每次检测需至少包含两株已知支原体菌株：一株为葡萄糖发酵型（如肺炎支原体或其等效种株），另一株为精氨酸水解型（如口腔支原体），通过两类菌株的平行对照，覆盖常见支原体检测场景。特殊场景下需额外补充菌株：检测昆虫细胞系时，需纳入螺原体（如 S.citri ATCC 29747、S.melliferum ATCC 29416 或等效菌种菌株），这类菌株营养需求更苛刻，且需匹配昆虫细胞系对应的较低孵化温度，确保特殊样品检测的针对性与有效性，避免因菌株配置不全导致漏检风险。

AdvSHENTEK外源因子全自动核酸检测分析系统凭借优越性能，为支原体检测提供坚实技术支撑。硬件方面，系统温度运行精度≤0.5℃，温度波动控制在 ±0.5℃以内，荧光强度 CV≤3%，确保检测结果的重复性与准确性；4 通道单独运行且支持同步检测，通道可叠加延展，兼顾检测效率与灵活性。软件方面，系统具备三级权限管理、日志审计追踪功能，完全符合 21CFR Part11 法规要求，支持 LIMS 系统连接、USB 数据导出及打印机直接打印，满足企业合规追溯需求。此外，系统运输与储存便捷，仪器可常规运输，检测试剂盒在 2-8℃环境下即可稳定保存，无需特殊冷链条件，进一步提升了产品的实用性与适配性。

抑制物质检测是支原体培养法的关键前置环节，旨在排除供试品中抑制成分对检测的干扰。湖州申科按 USP 标准执行：对供试品进行一次抑制物质检测，若生产方法发生变化可能影响支原体检测结果，需重复该检测。检测通过两组平行实验对比实现：一组培养基加入供试品，另一组不加供试品，同步开展营养特性测试，判断供试品是否含抑制物质。若检出抑制物质，需通过适当方法中和或抵消其作用，例如使用不含抑制剂的底物，或将供试品稀释在更大体积的培养基中，确保支原体能在检测体系中正常生长，避免因抑制成分导致检测结果失真。

湖州申科构建了覆盖全领域、全场景的支原体检测一站式合规解决方案。产品矩阵丰富，包括支原体 DNA 提取纯化试剂盒（2G）、检测试剂盒（2G，PCR - 荧光探针法）、DNA 校准品、一体化检测卡盒、外源因子全自动核酸分析系统，以及 10 余种支原体验证菌株（已上市猪鼻、肺炎、口腔支原体等，即将上市发酵、精氨酸支原体等）。方案具备极强的场景适配性，可应对 5% 人白、高浓度细胞等复杂基质样品，支持从起始材料到终产品的全流程检测，满足细胞疗法、抗体、疫苗、CRO/CDMO 等不同领域的检测需求。服务层面，提供从方法学建立、样品检测、适用性验证、传统法与 qPCR 法比对到特殊菌株定制的全流程技术支持，配合企业完成监管机构现场审计，满足企业从 IND 到 BLA/NDA 的申报需求，实现 “极简操作、一步加样、避免污染、全量检测” 的价值。